Phasefocus | Livecyte 2: Microscopía de alto contenido sin marcaje por tecnología QPI con software de análisis automatizado
Phasefocus es una empresa que ha desarrollado el versátil Citómetro Cinético, Livecyte 2! Este equipo es en esencia un microscopio con sistema de incubación de abordo, con estación de trabajo potente y software de alto contenido, reforzado por la tecnología patentada QPI para análisis label free. En resumen, el dispositivo es capaz de analizar miles de células, tanto sin marcar como marcadas en hasta palcas de 96 pocillos. La tecnología QPI (Quantitative Phase Imaging) fue premiado en 2013, y permitió que Livecyte también fuera premiada en 2017, estableciendo que trabajamos con una tecnología y dispositivo interesantes y reconocidos. QPI genera imágenes computacionales, dando lugar a imágenes por microscopia de alto contraste y cuantitativas, en un proceso conocido como Ptycografía. Es superior al contraste de fases ya que las células se muestran como estructuras iluminadas sobre un fondo negro (donde no hay señal), enormemente mejorar la información que puede ser adquirida de las células. Esta información con mayor detalle nos permite una mejor adquisición de datos en múltiples parámetros a ser analizados, y por tanto mejora la segmentación y diferenciación de las células.
El alto nivel de información que se puede obtener está asociado al software intuitivo, que alberga algoritmos potentes dando lugar a la opción de segmentar células individualmente, en todos los campos visionados en los pocillos seleccionados, dando mayor información del estado de las células en nuestros ensayos. Como tal, nuestros cultivos pueden ser analizados globalmente, célula a célula o segmentado por linaje celular. Las imágenes generadas en campo claro o con contraste de fases no tienen el nivel de contraste en señal a ruido, como el generado por QPI y que es comparable a imagen por fluorescencia. Sin embargo, no teniendo marcaje fluorescente elimina la presencia de otra variable exógena en el diseño experimental, dando lugar a unas condiciones más in vivo, a la vez que reducción de daño a las células por excitación fluorescente.
Un ensayo sencillo que puede realizar Livecyte, proliferación celular, ilustra las ventajas del dispositivo, como se ilustra en la Aplicación 1. Livecyte contó con gran precisión las células comparado a contaje visual gracias a su software de segmentación con una diferencia media de 1.9 células y sin diferencias estadísticas, y los resultados fueron comparables a un dispositivo de contaje automatizado. Además, los efectos de tratamiento con Estaurosporina (100nM) fueron analizados automáticamente durante el tratamiento buscando diferencias proliferativas. Además, esta técnica permitiría mayor caracterización de las células.
Las opciones disponibles con Livecyte crecen, incluyendo un panel para angiogénesis (actualmente en prelanzamiento). Mientras que las opciones de fluorescencia no se excluyen de Livecyte, un factor diferencial y ventaja de este citómetro cinético es la tecnología QPI utilizable en una variedad de aplicativos.
En Paralab Bio, estaríamos encantados de agendar una reunión para debatir sobre las funcionalidades de este citómetro cinético high content y cómo podría ayudar a no sólo su investigación si no la de sus compañeros en mayor detalle, en aplicativas que incluyen investigación oncológica, células madre, investigación farmacológica y muchas más áreas.